RPMI1640 培養基以羅斯韋爾公園紀念研究所（Roswell Park Memorial Institute，RPMI）命名，1640 為其代號。它是 McCoy's 5A 培養基的改進型，使用碳酸氫鹽緩沖系統。RPMI1640 培養基最初開發用于人類白血病細胞的懸浮或單層培養，后來發現也適用于多種哺乳動物細胞，包括 HeLa、Jurkat、MCF-7、PC-12、PBMC、星形膠質細胞和癌細胞，尤其適用于懸浮細胞的培養，是使用最為廣泛的培養基之一。RPMI1640 培養基與其他培養基的區別在于含有還原型谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養基含有EMEM和DMEM中沒有的生物素、維生素 B12 和對氨基苯甲酸，以及高濃度的氯化膽堿和肌醇。
